麻疹病毒(measles virus,MV)是麻疹的病原体,属于副黏病毒科、麻疹病毒属,只有一个血清型,自然界无动物宿主,可以通过空气飞沫和直接接触实现人间传播。目前麻疹病毒感染的实验室快速检测有:ELISA检测患者急性期血液IgM抗体,RT-PCR或实时荧光PCR检测急性期鼻咽分泌物或尿液病毒核酸等。
一、血清学诊断
(一)血清学诊断原理
利用酶联免疫吸附实验(ELISA)检测特异性IgM抗体,可以作为相关传染性疾病早期和新近感染的诊断依据。麻疹病毒IgM抗体检测常采用捕获法和间接法,目前实验室采用ELISA捕获法检测麻疹病毒IgM抗体。ELISA捕获法的原理为:利用包被在固相载体上的抗-μ链抗体,捕捉待检血清中的IgM,再与特异性抗原结合,最终形成带有酶标记的免疫复合物,加入底物显色,根据颜色深浅判定结果。
(二)血液标本采集
IgM血清学诊断中单份血标本于出疹后0d~28d内采集。如第1份血标本是在出疹后3d内采集的,检测IgM阴性,需要采集出疹后4d~28d内的第2份血标本,排除第1份血标本中可能出现的假阴性。
(三)结果分析
IgM阳性提示受检者麻疹病毒急性或近期感染,对阳性和可疑结果建议1~2周后再次采样检测,动态观察抗体水平的变化。IgM阴性不能完全排除麻疹病例诊断,这可能与采样时间过早或受麻疹病毒再次感染(继发性免疫失败)有关。对于相关暴发疫情,最好同时进行麻疹、风疹IgM抗体检测,必要时还需要进行其他发热、出疹性疾病的鉴别诊断。
二、分子生物学检测
聚合酶链式反应(PCR)是一种灵敏、特异、简便、快速基因检测技术。利用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法,可快速鉴别麻疹疫情和鉴定麻疹病毒。标本宜采取患者在出疹前3d至出疹后3d内的咽拭子或尿液标本。RT-PCR扩增出特异性核酸(片段)即阳性结果,提示受检者近期受到麻疹病毒感染或接种过麻疹疫苗。
目前,市疾控中心微检所采用实时荧光定量RT-PCR法检测麻疹病毒核酸,此法克服了传统RT-PCR易受污染、耗时长等缺点,具有反应快速、灵敏度高、特异性强等特点,适用于麻疹病毒的快速鉴定。
一、血清学诊断
(一)血清学诊断原理
利用酶联免疫吸附实验(ELISA)检测特异性IgM抗体,可以作为相关传染性疾病早期和新近感染的诊断依据。麻疹病毒IgM抗体检测常采用捕获法和间接法,目前实验室采用ELISA捕获法检测麻疹病毒IgM抗体。ELISA捕获法的原理为:利用包被在固相载体上的抗-μ链抗体,捕捉待检血清中的IgM,再与特异性抗原结合,最终形成带有酶标记的免疫复合物,加入底物显色,根据颜色深浅判定结果。
(二)血液标本采集
IgM血清学诊断中单份血标本于出疹后0d~28d内采集。如第1份血标本是在出疹后3d内采集的,检测IgM阴性,需要采集出疹后4d~28d内的第2份血标本,排除第1份血标本中可能出现的假阴性。
(三)结果分析
IgM阳性提示受检者麻疹病毒急性或近期感染,对阳性和可疑结果建议1~2周后再次采样检测,动态观察抗体水平的变化。IgM阴性不能完全排除麻疹病例诊断,这可能与采样时间过早或受麻疹病毒再次感染(继发性免疫失败)有关。对于相关暴发疫情,最好同时进行麻疹、风疹IgM抗体检测,必要时还需要进行其他发热、出疹性疾病的鉴别诊断。
二、分子生物学检测
聚合酶链式反应(PCR)是一种灵敏、特异、简便、快速基因检测技术。利用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法,可快速鉴别麻疹疫情和鉴定麻疹病毒。标本宜采取患者在出疹前3d至出疹后3d内的咽拭子或尿液标本。RT-PCR扩增出特异性核酸(片段)即阳性结果,提示受检者近期受到麻疹病毒感染或接种过麻疹疫苗。
目前,市疾控中心微检所采用实时荧光定量RT-PCR法检测麻疹病毒核酸,此法克服了传统RT-PCR易受污染、耗时长等缺点,具有反应快速、灵敏度高、特异性强等特点,适用于麻疹病毒的快速鉴定。
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