细菌的药物敏感试验(简称药敏试验),是指在体外测定药物抑制或杀死细菌能力的试验。药敏试验的目的:一是帮助临床医生选用最佳效果的药物进行感染性疾病的治疗,避免盲目追求大剂量治疗而造成药物中毒,或因对严重感染给药剂量不足而耽误治疗;二是可进行耐药菌株耐药性的流行病学调查,以了解本单位、本地区致病菌的耐药性变迁情况,在宏观上控制耐药性的发生和发展,控制院内感染;三是某些细菌的药敏试验还可作为其鉴定依据;四是耐药菌株的监测。对耐药菌株动态变化的监视,可为防治部门和药物生产部门提供新药的研究和评估信息,并利用耐药监测结果控制抗菌药物的使用,以延长药物的使用寿命。
目前我国主要以2006年临床实验室标准化协会(clinical laboratory standards institute, CLSI)以前为美国国家临床实验室标准委员会(National committee for clinical laboratory standards, NCCLS)所批准的《抗微生物药物敏感试验的执行标准》中的程序为指南。
一、适用的范围
1.任何可引起感染的细菌,当对其药物敏感性不能由鉴定结果获得可靠预测,为确保抗菌药物使用的有效性,应进行药敏试验。
2.细菌耐药性的流行病学调查及新抗生素的研究和评估。临床上,急症标本经直接涂片染色证实为单一致病菌时,可用标本直接作药敏试验,且药敏试验后,必须用标准方法复核一次。除此之外,不能用标本直接作药敏试验。
二、药敏试验的质量控制
药敏试验的精确度与准确性受多种因素的影响,为了保证结果的准确,必须进行质量保证工作。
1.选择适宜菌株作为质控菌。
2.质控菌株与待测标本按标准方法同步进行药敏试验。
3.药敏试验的全过程都应通过测试相应的质控菌株来监控,如30天的监控结果完全符合要求,可将每日监控转为每周监控。
三、药敏试验方法
1.纸片法:以测定抑菌环大小来判定对药物的耐受情况,其结果以敏感、中介、耐药表示。
2.稀释法:用一系列不同浓度的药物与细菌作用,找出能抑制细菌生长的最低浓度或灭杀细菌的最低浓度,其结果用最小抑菌浓度(MIC)或最小杀菌浓度(MBC)表示。
3.自动化细菌鉴定仪中的药敏系统:其原理是通过检测浓度和荧光指示剂的荧光强度或荧光底物的水解反应来判断结果。其优点是快速、便于计算机管理,可随时打印出统计学报告。
4.Etest方法:结合了扩散法和稀释法的原理设计,对各种耐药表型如中低度耐药株,延迟表达耐药的菌株均可获得良好的效果。同时,Etest方法具有精确的MIC梯度。
四种方法中,最常用的是纸片法和稀释法。
