流感是至今尚无法完全加以控制的一种病毒性急性呼吸道传染病，同时也是国际上第一个实现全球监测的传染病。我国是流感的多发地，中国的流感动态正受到世界各国的关注。

流感病毒分离是流感病原检测的金标准，多年来，我国和世界各地实验室分离流感病毒的方法都是MDCK细胞分离和鸡胚分离，东莞市疾病预防控制中心实验室一直以来也同时开展这两种的分离方法。细胞分离法是将样品接种于MDCK（狗肾细胞）后观察细胞有否病变，鸡胚分离是将样品接种于9-11日龄鸡胚的羊膜腔和尿囊腔后，收集鸡胚培养液进行血凝实验判断是否分离到病毒。

两种方法相比，MDCK细胞培养法有许多优点：病毒分离阳性率高，应急性强，比较经济、方便，可消除外界因素的影响，对疫苗生产来说其抗原性状更接近于自然流行株，可减少宿主蛋白成分，具有广泛的应用前景；缺点是病毒复制后不易保存，保存时易使病毒滴度丢失，传代细胞含致癌因子。因此，通过传代细胞获得的病毒不宜用于疫苗生产，同时随细胞代数增加，对病毒敏感性下降。鸡胚培养法的优点是组织分化程度低，可选择适当途径接种，病毒易复制，感染病毒的膜和液体含大量病毒，是个整体，有神经血管的分布及脏器的构造，来源充足，操作简单，通常是无菌的，对接种的病毒不产生抗体；缺点是除产生引起鸡胚死亡的病毒外，一般的病毒通常不使鸡胚产生特异性的感染指征，必须利用第二个指示系统来测定病毒的存在。

为了提高流感病毒的分离率，应注意以下工作：（1）在细胞培养法中，由于它的维持液中不存在蛋白水解酶，无法将病毒颗粒非裂解型的HA0变成裂解型的HA1+HA2，故须在维持液中加入适量的胰酶，才能提高流感病毒在细胞中的复制能力。维持液中胰酶的加入与浓度对细胞接种分离病毒至关重要。（2）无论是鸡胚还是细胞培养阳性收获液传代前需经无菌处理，否则易造成污染。（3）为了防止细胞代谢产物使细胞培养液易变酸，加入HEPES可起到很好的缓冲作用。（4）细胞液收获之前将细胞冻融1-2次，可提高收获标本的病毒滴度。（5）由于流感病毒引起受感染的细胞病变无特殊的指征，故借助显微镜观察CPE来判断阳性是不可靠的，需全面进行HA试验来判断阳性。