淋病奈瑟菌的实验室检测
  • 2022-03-31 10:19
  • 来源: 微生物检验所
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淋病是典型的性传播疾病之一,不仅影响生产劳动,还可能导致患者不孕不育,对患者的身心健康危害极大。在我国,淋病属于乙类法定报告传染病。而引起淋病的病原体就是淋病奈瑟菌,也称淋球菌。

淋球菌的致病机理复杂,其毒力与菌毛、荚膜、脂多糖和外膜蛋白的某些成分有关。有研究表明,淋球菌菌落衰老时菌毛亦随之消失,接种尿道后并不产生尿道炎,说明菌毛是该菌必须的毒力因子。

一、临床表现

淋病的潜伏期平均约2~14d,随后出现临床症状。淋球菌侵入泌尿生殖系统,男性引起尿道炎,女性引起尿道炎和子宫颈炎,但可有50%~60%的女性并无自觉症状或症状轻微,如治疗不彻底,可扩散至生殖系统,胎儿可经产道感染造成新生儿淋病性急性结膜炎,也称新生儿浓漏眼。甚至可引起关节、心肌和直肠等组织的病变。

二、流行病学特征

人类是淋球菌唯一的自然宿主,淋病主要由性接触而传播,还可能通过毛巾、浴池等途径间间接传播。人群普遍易感。淋病在新中国建立后曾经一度绝迹,改革开放后又重新从外国传入,目前流行情况不容乐观。

三、防治原则

淋病是一种发病率比较高的性传播疾病。预防淋病传播首先要禁止卖淫嫖娼,其次是在群众中加强性病预防知识的宣传和教育。对于患有淋病的孕妇,需要在分娩时用氯链合剂给新生儿滴眼,预防新生儿浓漏眼。加强对高风险人群的监测,及时发现患者,争取早期用药,彻底治疗。目前可以选用的药物有青霉素、头孢菌素和博来霉素等。

四、生物学特性

淋球菌为革兰阴性圆形或椭圆形球菌,常成对排列,菌体接触面扁平或稍凹。无鞭毛,无芽孢,从病人新分离株可有荚膜。

淋病菌为需氧菌,最初从人体标本分离时,为促进其生长,需在5%~10%二氧化碳中培养。该菌营养要求较高,培养基中需加入腹水或血液。最适生长温度为35~36℃。淋病菌在巧克力培养基上培养24h,形成圆形、光滑、湿润、半透明或灰白色菌落,用接种环触之有黏性,菌落大小和透明度与取材部位和淋病菌的型别有关系。如继续培养,菌落面积增大或放扁平菌落,表面变得粗糙,边缘可出现皱缩。

该菌抵抗力弱,对一般消毒剂敏感。在干燥环境中数小时内死亡,在脓液中保持传染性10~20h,在50℃5min即灭活。对环丙沙星、青霉素较敏感,但易产生耐药性。

五、实验室检测

(一)标本采集与运输

1.标本采集

(1)尿道标本:男性急性尿道炎患者用棉拭子蘸取脓性分泌物,非急性期病人用无菌细小棉拭子深入尿道2~4cm,转动拭子后取出。女性患者取材前,先用无菌生理盐水清洁尿道口周围,忌用酒精消毒,尿道口简单分泌物时以棉拭子蘸取,无分泌物时则可像男性那样,将棉拭子插入尿道取材。

(2)子宫颈标本:应使用窥阴器(以无菌生理盐水湿润,而非其他清洁剂),充分暴露子宫,先用无菌棉拭子擦去宫颈口分泌物,再用另一棉拭子深入宫颈内1cm处旋转取出分泌物。

(3)眼结膜分泌物:怀疑淋球菌性结膜炎时,取结膜分泌物。

2.样本运输

淋球菌对外环境变化十分敏感,为保证培养成功,标本离体时间越短越好。必须运输时,应将标本接种于Stuart或Amies运送培养基中,并注意保温。

(二)检验方法

1.直接涂片镜检

将分泌物轻轻滚动制成涂片,革兰染色后镜检,在急性淋病患者的尿道分泌物中,大多数淋球菌位于脓细胞内,慢性则多在脓细胞外。如在多核粒细胞内发现革兰阴性双球菌,结合临床症状,即可诊断。对男性急性期病人,敏感性和特异性接近100%。

2.分离培养

标本应尽快接种到预温的培养基上,涂抹约四分之一的培养基表面,然后用接种环划线,以便尽可能获得单个菌落,不要使用存放过久的培养基。接种后放于5%~10%CO2环境,37℃培养24h,观察菌落形态,并对可疑菌落进行进一步的生化鉴定。注意培养环境中保持一定湿度。

3.免疫学与血清学试验

可以用直接免疫荧光染色的方法来对淋球菌进行鉴定,通过一系列操作制成疑似菌的玻片,在荧光显微镜下观察,可见到发绿色荧光的菌体即为阳性。但是,因该方法需要荧光显微镜和较高的操作技能,不适宜在基层实验室推广,一般作为疑难菌株的鉴定手段之一。

4.药物敏感性试验

由于耐药菌株的出现,为保障临床治疗效果,临床分离的淋球菌均需要进行药物敏感性试验。常用的药敏实验方法有纸片扩散法、琼脂稀释法和E-test法等。





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