幽门螺杆菌的实验室检测
  • 2020-07-02 16:45
  • 来源: 微生物检验所
  • 【字体:  


幽门螺杆菌Helicobacter pyloriHP是螺杆菌属的代表种,它与人类胃窦炎、十二指肠溃疡、胃溃疡、胃腺癌和胃黏膜相关B细胞淋巴瘤的发生关系密切,可从哺乳动物和鸟类的胃肠道和肝胆管道中分离获得。HP主要定植在毗连上皮组织的胃黏膜或黏膜下,也可短暂停留在十二指肠近端、唾液、胃液(呕吐物)和粪便中,极少侵入血液。

1982年,澳大利亚临床微生物学家Barry Marshall Robin Warren最先从胃炎病人的胃活组织标本中成功分离培养出HP,并提出HP与消化道溃疡和胃癌之间存在联系,获得了2005年诺贝尔医学奖。

一、感染有幽门螺杆菌的临床症状

感染HP后,患者在潜伏期的两个月内,可发生急性胃炎(腹痛、恶心、呕吐),但大多数感染者为HP慢性感染,常表现为不同症状的慢性胃炎。在慢性胃炎活跃期,常容易诱发胃酸过多症和十二指肠溃疡。感染HP病人多出现复发性的非溃疡消化不良和十二指肠溃疡,其中16%的感染者会进一步发展为十二指肠溃疡。现大多数的十二指肠溃疡和胃溃疡的发生与HP感染有关。HP长期感染的病人,长期炎症可导致多病灶萎缩性胃炎,目前认为此多病灶萎缩性胃炎是胃溃疡和胃腺癌的早期症状。

二、幽门螺杆菌的流行病学特征及防治

HP感染呈全球分布,不同地区、不同人群之间存在很大的差别,在经济不发达和卫生状况差的地区,感染率较高。人可能是主要传染源,主要通过消化道传播。流行病学研究提示HP感染有家庭内聚集现象。

目前尚无有效的预防措施,因尿素酶和热休克蛋白是唯一表达在细菌表面的蛋白,以其作为抗原开发的疫苗正在研制中。治疗可用抗菌疗法,多采用以枸橼酸铋钾或抑酸剂为基础,再加两种抗生素的三联疗法。

三、幽门螺杆菌的实验室检测

HP是一种多鞭毛、螺旋形弯曲的细菌,革兰染色阴性,运动活泼。它是一种微需氧菌,喜欢在潮湿的环境生长,最适宜的生长温度是37。营养要求高,培养时需要动物血清或血液。实验室检验方法有:

(一)显微镜检查

1直接镜检:取胃、十二指肠黏膜活检标本进行革兰染色,在油镜下查找细长弯曲或呈海鸥状排列的菌体。有黏膜部位观察,阳性率高。此方法在临床上为HP感染诊断的金标准之一。

2印迹细胞学检查:为组织病理学检查胃窦活组织标本提供了一种快速的辅助手段。印迹细胞学可能比组织学检测法检测更敏感。

(二)分离鉴定

1分离培养:HP的细菌学培养通常不如组织学检查的敏感性高,但若要进行流行病学调查和药物敏感实验,培养仍不可缺少。用选择性和非选择性培养基同时分离该菌,可提高分离率。在微需氧环境下,37培养3~5天,在选择性培养基上长出细小、灰白色、半透明、不溶血的菌落。

2鉴定:革兰染色或活组织检查等形态学观察、过氧化氢酶检测、氧化酶检测和脲酶检测等可鉴定HP革兰染色阳性片可见革兰染色阴性、S状弯曲或短杆菌。暗视野或相差显微镜下亦可观察到典型的钻探样运动。此方法在临床上被认为是检测的金标准,是HP感染的确切证据。但是此方法费时、费力、周期长。

(三)生化方法

1快速脲酶试验:HP可产生大量的胞外脲酶,因此可通过检测该酶来诊断HP感染。

2核素标记试验:临床上常见的是13C-尿素呼气试验、14C-尿素呼气试验、15N-尿氨排出试验三种方法。运用HP可分泌尿素酶分解尿素的特性,通过检测患者口服含有核素标记的尿素后排出的气体或尿液中核素的含量,可以判断患者是否感染HP。此方法为无创检测方法,更易被老人、儿童所接受。

(四)分子生物学检测

目前主要采用实时荧光PCR方法对细菌核酸进行检测,其特点是需要昂贵的热循环仪、检测速度较快、需要原始菌,可作为临床上重要辅助检测手段。

(五)免疫学检测

这是一种操作简单、廉价的诊断HP感染的方法。常见的检验标本有血清、粪便、唾液等。但无法区分是否为现时还是既往感染,因此多被用于流行病学与回顾性研究。

血清学检测是判断幽门螺杆菌感染的主要初筛方法。




扫一扫在手机打开当前页
页脚