免疫胶体金技术(Immune colloidal gold technique)是以胶体金作为示踪标志物应用于抗原抗体的一种新型的免疫标记技术,英文缩写为:GICT。胶体金是由氯金酸(HAuCl4)在还原剂如白磷、抗坏血酸、枸橼酸钠、鞣酸等作用下,聚合成为特定大小的金颗粒,并由于静电作用成为一种稳定的胶体状态,称为胶体金。胶体金在弱碱环境下带负电荷,可与蛋白质分子的正电荷基团形成牢固的结合,由于这种结合是静电结合,所以不影响蛋白质的生物特性。胶体金除了与蛋白质结合以外,还可以与许多其他生物大分子结合,如SPA、PHA、ConA等。根据胶体金的一些物理性状,如高电子密度、颗粒大小、形状及颜色反应,加上结合物的免疫和生物学特征,因而使胶体金广泛地应用于免疫学、组织学、病理学和细胞生物学等领域。
免疫胶体金技术具有以下优点:1.使用快速方便,便于基层使用和现场使用,所有反应基本能在15分钟内完成。2.成本低,不需要特殊的仪器设备。3.应用范围广,可适应多种检测条件。4.标记物稳定,标记样品在4℃贮存两年以上,无信号衰减显像。5.胶体金本身为红色,不需要加入发色试剂,省却了酶标的致癌性底物及终止液的步骤,对人体无毒害。
我中心微检所实验室用于登革热抗体初筛的检测试剂正是使用胶体金免疫层析方法。层析法免疫胶体金检测试剂实际上是免疫胶体金技术和抗原抗体反应相结合而形成的一种应用形式。将特异的抗原或抗体以条带状固定在膜上,胶体金标记试剂(抗体或单克隆抗体)吸附在结合垫上,当待检样本加到试纸条一端的样本垫上后,通过毛细作用向前移动,溶解结合垫上的胶体金标记试剂后相互反应,再移动至固定的抗原或抗体的区域时,待检物与金标试剂的结合物又与之发生特异性结合而被截留,聚集在检测带上,可通过肉眼观察到显色结果。